IPTG CAS:367-93-1 Cena výrobcu
Izopropyl β-D-1-tiogalaktopyranozid (IPTG) je syntetický analóg laktózy, ktorý sa bežne používa vo výskume molekulárnej biológie a biotechnologických aplikáciách.IPTG sa primárne používa na vyvolanie expresie génov v bakteriálnych systémoch, kde slúži ako molekulárny spúšťač na spustenie transkripcie cieľových génov.
Po pridaní do rastového média je IPTG absorbovaný baktériami a môže sa viazať na lac represorový proteín, čím mu zabraňuje blokovať aktivitu lac operónu.Lac operón je zhluk génov zapojených do metabolizmu laktózy a keď sa odstráni represorový proteín, gény sa exprimujú.
IPTG sa často používa v spojení s lacUV5 mutantným promótorom, ktorý je konštitutívne aktívnou verziou lac promótora.Kombináciou indukcie IPTG s týmto mutantným promótorom môžu výskumníci dosiahnuť vysoké úrovne génovej expresie.To umožňuje produkciu veľkého množstva proteínu na čistenie alebo iné následné aplikácie.
Okrem génovej expresie sa IPTG často používa aj v modro/bielych skríningových testoch.Pri tejto technike je lacZ gén typicky fúzovaný s požadovaným génom a baktérie, ktoré úspešne exprimujú tento fúzny gén, budú produkovať aktívny β-galaktozidázový enzým.Keď sa IPTG pridá spolu s chromogénnym substrátom, ako je X-gal, baktérie, ktoré exprimujú fúzny gén, zmodrajú v dôsledku aktivity β-galaktozidázy.To umožňuje identifikáciu a selekciu rekombinantných kmeňov, ktoré úspešne integrovali požadovaný gén.
Indukcia génovej expresie: IPTG sa bežne používa na indukciu expresie cieľových génov v bakteriálnych systémoch.Napodobňuje prirodzený induktor laktózy a viaže sa na lac represorový proteín, čím mu bráni blokovať lac operón.To umožňuje transkripciu a expresiu požadovaných génov.
Expresia a čistenie proteínov: Indukcia IPTG sa často používa na produkciu veľkého množstva rekombinantných proteínov na rôzne účely, ako sú biochemické štúdie, terapeutická produkcia alebo štrukturálna analýza.Použitím vhodných expresných vektorov a IPTG indukcie môžu výskumníci dosiahnuť vysoké úrovne produkcie cieľového proteínu v bakteriálnych hostiteľoch.
Modro/biely skríning: IPTG sa často používa v kombinácii s génom lacZ a chromogénnym substrátom, ako je X-gal, na modro/biele skríningové testy.LacZ gén je typicky fúzovaný s požadovaným génom a baktérie, ktoré úspešne exprimujú tento fúzny gén, budú produkovať aktívny β-galaktozidázový enzým.Keď sa pridá IPTG a chromogénny substrát, rekombinantné kmene exprimujúce fúzny gén zmodrajú, čo umožňuje ľahkú identifikáciu a selekciu.
Štúdium génovej regulácie: IPTG indukcia sa bežne používa vo výskume na štúdium regulácie génov a operónov, najmä lac operónu.Manipuláciou s koncentráciami IPTG a monitorovaním expresie zložiek lac operónu môžu výskumníci skúmať mechanizmy génovej regulácie a úlohu rôznych faktorov alebo mutácií.
Systémy génovej expresie: IPTG je kľúčovou zložkou v niekoľkých systémoch génovej expresie, ako sú systémy založené na promótoroch T7.V týchto systémoch sa lac promótor často používa na riadenie expresie T7 RNA polymerázy, ktorá zase transkribuje cieľové gény pod kontrolou sekvencií promótora T7.IPTG sa používa na vyvolanie expresie T7 RNA polymerázy, čo vedie k aktivácii expresie cieľového génu.
| Zloženie | C9H18O5S |
| Skúška | 99 % |
| Vzhľad | Biely prášok |
| CAS č. | 367-93-1 |
| Balenie | Malé a objemné |
| Čas použiteľnosti | 2 roky |
| Skladovanie | Skladujte na chladnom a suchom mieste |
| Certifikácia | ISO. |
