2-NITROFENYL-BETA-D-GLUKOPYRANOZID CAS: 2816-24-2

Enzýmový substrát: ONPG sa bežne používa ako substrát pre beta-galaktozidázu, enzým, ktorý hydrolyzuje ONPG za vzniku žltej zlúčeniny (o-nitrofenol), ktorú možno ľahko detegovať spektrofotometricky. Táto enzymatická reakcia sa môže použiť na meranie aktivity beta-galaktozidázy, vďaka čomu je ONPG cenným nástrojom v enzymologických štúdiách.

Molekulárno-biologické testy: ONPG sa používa ako substrát v rôznych molekulárno-biologických testoch, najmä v testoch reportérového génu beta-galaktozidázy. V týchto testoch sa substrát na báze ONPG používa na meranie aktivity reportérového génu, ktorý je typicky regulovaný konkrétnou promótorovou sekvenciou, ktorá je predmetom záujmu. Aktivita beta-galaktozidázy, indikovaná zmenou farby vznikajúcou pri hydrolýze ONPG, poskytuje cenné informácie o aktivite promótora.

Analýza génovej expresie: ONPG sa používa aj pri analýze génovej expresie. Prepojením sledovanej promótorovej sekvencie s génom beta-galaktozidázy môžu výskumníci merať aktivitu beta-galaktozidázy pomocou ONPG ako substrátu. Úroveň aktivity beta-galaktozidázy odráža silu a aktivitu promótora, čo umožňuje posúdenie hladín génovej expresie.

Diagnostické aplikácie: ONPG sa môže používať v diagnostických aplikáciách, najmä pri detekcii patogénnych mikroorganizmov. Rôzne baktérie, ako napríklad Escherichia coli a niektoré druhy Shigella a Salmonella, produkujú beta-galaktozidázu, ktorá dokáže štiepiť ONPG. Táto hydrolýzna reakcia spôsobuje viditeľnú zmenu farby, ktorú možno použiť na určenie prítomnosti týchto baktérií v klinických vzorkách.