Fenylgalaktozid CAS:2818-58-8

Účinok na aktivitu enzýmu: Fenylgalaktozid sa bežne používa na meranie aktivity enzýmu β-galaktozidázy.Keď je fenylgalaktozid hydrolyzovaný β-galaktozidázou, uvoľňuje p-nitrofenol.Akumuláciu p-nitrofenolu možno kvantitatívne merať, čo poskytuje pohľad na aktivitu β-galaktozidázy.Tento efekt sa využíva v aplikáciách, ako sú enzýmové testy a skríningové systémy.

Analýza génovej expresie: Fenylgalaktozid sa často používa ako substrát v experimentoch molekulárnej biológie na štúdium génovej expresie.Gén lacZ, ktorý kóduje p-galaktozidázu, je bežne fúzovaný s regulačnými sekvenciami iných požadovaných génov.Expresia génu lacZ a hydrolýza fenylgalaktozidu β-galaktozidázou môže indikovať expresný vzor a úroveň študovaného cieľového génu.

Skríningové systémy: Fenylgalaktozid je dôležitou súčasťou skríningových systémov, ktoré využívajú aktivitu β-galaktozidázy.Jedným široko známym príkladom je modro-biela skríningová metóda, ktorá sa používa na identifikáciu rekombinantných alebo transformovaných buniek v experimentoch molekulárnej biológie.Kolónie, ktoré úspešne prijali rekombinantnú DNA alebo prešli genetickou rekombináciou, budú exprimovať β-galaktozidázu, čo vedie k hydrolýze fenylgalaktozidu a vytvoreniu modrej farby.

Purifikácia proteínov: V niektorých prípadoch sa môže fenylgalaktozid použiť ako ligand pre afinitnú chromatografiu na čistenie proteínov, ktoré sa špecificky viažu na β-galaktozidázu alebo sú ňou aktivované.Požadovaný proteín môže mať afinitnú značku alebo fúznu značku obsahujúcu doménu viažucu P-galaktozidázu.Prechodom proteínovej zmesi cez kolónu s imobilizovaným fenylgalaktozidom môže byť požadovaný proteín selektívne zadržaný a následne eluovaný.